Molekulinė diagnozė atitinka molekulinių metodų rinkinį, kurio tikslas yra nustatyti DNR pokyčius, kurie, pavyzdžiui, gali rodyti genetines ligas ar vėžį. Be to, molekuliniai metodai yra plačiai naudojami infekcinėms ligoms nustatyti ir patvirtinti, nes jie reiškia greitesnį ir tikslesnį diagnostikos metodą.
Molekulinė diagnozė yra brangi, todėl gydytojai to nereikalauja labai dažnai, tačiau ji pateikia tikslius rezultatus, susijusius su pokyčio buvimu, būdu, kuris gali sutrikdyti organizmo funkcionavimą ir paciento reakcija į gydymas.
Kam jis skirtas?
Molekulinę diagnozę galima atlikti keliais tikslais, iš kurių pagrindiniai yra:
- Su leukemija susijusių mutacijų, tokių kaip BCR-ABL translokacijos, būdingos lėtinei mieloidinei leukemijai (LML), identifikavimas; Būdinga hematologinių ligų mutacija, pavyzdžiui, paveldima hemochromatosis, polycythemia vera, esminė trombocitemija ir trombofilija, pvz. Molekuliniai pokyčiai, rodantys vėžio atsiradimą, pavyzdžiui, gaubtinės ir tiesiosios žarnos, plaučių, krūties ir smegenų vėžys; Be ŽPV viruso nustatymo, diagnozuojamos ir infekcinės ligos, tokios kaip hepatitas, uretritas, toksoplazmozė, leišmaniozė ir kt.
Molekulinė diagnozė, nepaisant to, kad yra laikoma brangia, palyginti su kitomis diagnostikos metodikomis, yra tikslesnė, nes sugeba informuoti apie pokyčius, susijusius su tam tikra liga, ir apie šio pokyčio įtakos laipsnį organizme, taip padėdami asmeniui gydyti.
Be to, kad molekuliniai metodai naudojami diagnozuojant įvairias ligas, jie taip pat naudojami įvertinant atsaką į gydymą, ypač vėžiu sergantiems žmonėms, ir tai yra vienas efektyviausių metodų, rodančių ligos progresavimą ir atkrytį.
Kaip tai daroma
Molekulinę diagnozę gali atlikti bet kuris mėginys, paprašytas gydytojo, kuris geriausiai gali suteikti informacijos apie paciento būklę, tai gali būti šlapimas, seilės ar daugeliu atvejų kraujas. Nereikia pasninko ar kitokio pasiruošimo egzaminui.
Mėginys surenkamas ir išsiunčiamas į laboratoriją kartu su gydytojo nurodymais, informuojančiais apie egzaminą ar tyrimų tipą, kuris turėtų būti atliktas. Atlikta molekulinė technika priklauso nuo reikalaujamo egzamino ir apima tikslių procedūrų, kuriomis siekiama nustatyti, ar nėra pakitimų, kurių paprašė gydytojas, buvimą ar nebuvimą.
Paprastai naudojamas tik nedidelis išsiųsto mėginio kiekis, o likusieji kaupiami taip, kad prireikus egzaminas būtų pakartotas.
Pažiūrėkite, kokie yra pagrindiniai molekuliniai metodai
PGR
PGR, trumpai apibūdinanti polimerazės grandininę reakciją arba polimerazės grandininę reakciją , yra molekulinė technika, susidedanti iš genetinės medžiagos fragmento - DNR arba RNR - amplifikavimo, siekiant nustatyti mutacijas ir tokiu būdu padėti diagnozuojant ligas..
Šis metodas pagamintas ekstrahuojant ir išgryninant genetinę medžiagą, kuri dedama į mišinį, kuriame vienas iš komponentų yra restrikcijos fermentas, kuris kinta priklausomai nuo reikalaujamo tyrimo ir kurio paskirtis yra supjaustyti medžiagą į fragmentus. kad būtų galima nustatyti galimą genetinį pakitimą. Mišinys dedamas į termociklerį, kuris yra prietaisas, veikiantis temperatūros svyravimus, kuriuos nurodo specialistas pagal egzaminą, ir tokiu būdu leidžiantis sustiprinti genetinį fragmentą. Įprasto PGR atveju, po amplifikacijos, PGR produktui taikoma elektroforezė, tai yra molekulinė technika, pagrįsta fragmentų svoriu ir dydžiu, tai yra, atsižvelgiant į šias savybes, susidaro juostos schema, kurios analizė atliekama. remiantis teigiamos kontrolės juosta, tai yra juosta, kuri, kaip žinoma, atitinka genetinį pakitimą.
Realiojo laiko PGR, dar vadinama qPCR, yra kiekybinio PGR rūšis, tai yra, be genetinio pakitimo identifikavimo, ji gali suteikti informacijos ir apie genų ekspresiją, tai yra, kiek pakitęs genas yra ekspresuojamas organizme., todėl jis gali būti naudojamas diagnozei palengvinti ir gydyti. Realaus laiko PGR nereikia elektroforezės, visą genetinės medžiagos amplifikavimo ir analizės procesą atlieka prietaisas, o rezultatą aiškina apmokytas sveikatos priežiūros specialistas.
Sekavimas
Sekavimas yra molekulinė technika, kurią sudaro DNR nukleotidų, kurie sudaro genetinę medžiagą, sekos nustatymas. Sekavimas vyksta iš reakcijos, panašios į PGR, tačiau į amplifikacijos mišinį modifikuoti nukleotidai pridedami pridedant fluoro chromus, kurie, medžiagai amplifikuojant, modifikuoti nukleotidai yra įtraukiami į DNR ir sukuria kelis fragmentus, kurie atitinka sekos produktą.
Reakcijos produktas dedamas į įtaisą, vadinamą DNR sekavimo įtaisu, kuriame, fragmentams pasiekiant įrangos lazerį, sužadinami fluorochromai, skleidžiant fluorescenciją, kurią įranga rodo smailėmis, o kiekviena smailė atitinka į nukleotidą. Pasibaigus reakcijai, įranga informuos DNR seką ir tokiu būdu galės padėti gydytojui diagnozuoti genetines ligas.
